(1)温度

反硝化细菌的最适合生长温度为20 ~40%;低于15℃时,反硝化速率明显降低。因此，在冬季低温季节，为了保持一定的反硝化速率, 需要提高污泥停留时间，同时降低负荷或提高污水的停留时间。

(2)溶解氧

必须保持严格的缺氧状态，保持氧化还原电位为-110~ -50mV;为使反硝化反应正常进行，悬浮型活性污泥系统中的溶解氧应保持在0. 2mg/L以下;附着型生物处理系统可以容许较高的溶解氧浓度(一般低于1mg/L)。

(3) pH值

硝化反应的最佳pH值范围是6.5 ~7.5。

(4)碳源有机物质

反硝化反应需要提供足够的碳源，碳源物质不同，反硝化速率也将有区别。实验表明甲醇、乙酸、丙酸、丁酸、葡萄糖等均能作为反硝化脱氮的碳源，但反硝化速率有所不同，其中甲醇和乙酸作为碳源时反硝化最快,工程应用最多的是甲醇、乙酸。

(5)碳氮比

污水BOD₅与TN的比值一般应维持在5~7左右，这样既不会使反硝化所需碳源太少,也不会使硝化所要求的碳源太多。

(6)有毒物质

镍浓度大于0.5mg/L、亚硝酸盐氮含量超过30mg/L或盐度高于0.63%时，都会抑制反硝化作用。